2×PCR Master Mix (sem corante)
PCR Master Mix é um tipo de solução pré-misturada de PCR convencional que está pronta para uso, incluindo Taq DNA Polimerase, mistura dNTP MgCl2 e tampão otimizado.Durante a reação, apenas o primer e o modelo podem ser adicionados para amplificação, o que simplifica bastante as etapas de operação do experimento.Este produto contém excelentes estabilizadores e pode ser armazenado por 3 meses a 4°C.O produto de PCR tem protrusão de 3'-dA e pode ser facilmente clonado no vetor T.
Condições de armazenamento
O produto deve ser armazenado a -25°C ~ -15°C por dois anos.
Especificações
| Fidelidade (vs. Taq) | 1× |
| Início quente | No |
| Saliência | 3'-A |
| Polimerase | Polimerase de DNA Taq |
| Formato de reação | SuperMix ou Master Mix |
| Velocidade de reação | Padrão |
| Tipo de Produto | Mistura Principal de PCR (2×) |
Instruções
1.Sistema de reação
| Componentes | Tamanho (μL) |
| Modelo de DNA | Adequado |
| Primer 1 (10 μmol/L) | 2 |
| Primer 2 (10 μmol/L) | 2 |
| Mistura Mestre PCR | 25 |
| ddH2O | Até 50 |
2.Protocolo de Amplificação
| Etapas do ciclo | Temperatura (°C) | Tempo | Ciclos |
| Pré-desnaturação | 94 ℃ | 5 minutos | 1 |
| Desnaturação | 94 ℃ | 30 segundos | 35 |
| anelamento | 50-60 ℃ | 30 segundos | |
| Extensão | 72 ℃ | 30-60seg/kb | |
| Extensão Final | 72 ℃ | 10 minutos | 1 |
Notas:
1) Uso do modelo: 50-200 ng de DNA genômico;0,1-10 ng de DNA plasmídico.
2) mg2+concentração: Este produto contém 3 mM de MgCl2 adequado para a maioria das reações de PCR.
3) Temperatura de recozimento: Consulte o valor teórico de Tm dos Primers.A temperatura de recozimento pode ser ajustada para 2-5 ℃ inferior ao valor teórico do primer.
4) Tempo de extensão: Para identificação molecular, recomenda-se 30 segundos/kb.Para clonagem genética, 60seg/kb é recomendado.
Notas
1.Para sua segurança e saúde, use jalecos e luvas descartáveis para operação.
2.Apenas para uso em pesquisa!
