2×PCR Super Mix (com corante)
2× PCR Master Mix contém Taq DNA Polimerase, dNTPs e outros componentes necessários para PCR.O Master Mix é estável por 3 meses a 4°C com nossos estabilizadores personalizados.A solução pré-misturada é otimizada para PCR convencional e pronta para uso com a adição de molde de DNA e primers.Os produtos de PCR podem ser carregados diretamente para eletroforese com corante azul de bromofenol pré-carregado.Os produtos amplificados contêm protrusão 3'-dA e podem ser facilmente clonados no vetor T.O 2×PCR Master Mix simplifica o procedimento de PCR e reduz a contaminação.
Condições de armazenamento
Os produtos devem ser armazenados a -25℃~-15℃ por 2 anos.
Especificações
Fidelidade (vs.Taq) | 1× |
Início quente | No |
Saliência | 3'-A |
Polimerase | Polimerase de DNA Taq |
Formato de reação | SuperMix ou Master Mix |
Velocidade de reação | Padrão |
Tipo de Produto | Mistura Principal de PCR (2x) |
Instruções
1.Sistema de reação
Componentes | Volume(μL) |
Modelo de DNA | Adequado |
Primer 1 (10 μmol/L) | 2 |
Primer 2 (10 μmol/L) | 2 |
2× mistura mestre de PCR | 25 |
ddH2O | para 50 |
2.Protocolo de Amplificação
Etapas do ciclo | Temperatura (°C) | Tempo | Ciclos |
Desnaturação inicial | 94 | 5 minutos | 1 |
Desnaturação | 94 | 30 segundos | 35 |
anelamento | 50-60 | 30 segundos | |
Extensão | 72 | 30-60 seg/kb | |
Extensão final | 72 | 10 minutos | 1 |
Observação:
1) Uso do modelo: 50-200ng de DNA genômico;0,1-10 ng de DNA plasmídico.
2) mg2+concentração: Este produto contém 3mM de MgCl2, adequado para a maioria das reações de PCR.
3) Temperatura de recozimento: Consulte o valor teórico de Tm dos primers.A temperatura de recozimento pode ser ajustada para 2-5°C inferior ao valor teórico do primer.
4) Tempo de extensão: Para identificação molecular, recomenda-se 30 segundos/kb.Para clonagem genética, recomenda-se 60 seg/kb.
Notas
1.Os produtos PCR com 2× PCR Master Mix não são adequados para eletroforese em gel de poliacrilamida.
2.Para sua segurança e saúde, use jalecos e luvas descartáveis para operação.
3.É usado SOMENTE para pesquisa!