Fosfatase Alcalina (ALP)
Descrição
A Fosfatase Alcalina é derivada de uma cepa recombinante de E. coli que carrega o gene TAB5.A enzima catalisa a desfosforilação das extremidades 5' e 3' dos fosfomonoésteres de DNA e RNA.Além disso, hidrolisa a ribose, bem como os desoxirribonucleosídeos trifosfatos (NTPs e dNTPs).A Fosfatase Alcalina TAB5 atua nas extremidades 5´ salientes, 5´ recuadas e rombas.A Fosfatase pode ser usada em muitas aplicações de biologia molecular, como clonagem ou marcação de extremidades de sondas para remover as extremidades fosforiladas de DNA ou RNA.Em experimentos de clonagem, a desfosforilação impede que o DNA plasmídico linearizado se autoligue.Também pode degradar dNTPs não incorporados em reações de PCR para preparar um modelo para sequenciamento de DNA.A enzima é completa e irreversivelmente inativada por aquecimento a 70°C por 5 minutos, tornando desnecessária a remoção da fosfatase antes da ligação ou marcação final
Uso
1. A fosfatase alcalina acoplada a proteínas (anticorpos, estreptavidina, etc.) pode identificar especificamente moléculas alvo e pode ser usada em ELISA, WB e detecção histoquímica;
2. A fosfatase alcalina pode ser usada para desfosforizar o terminal 5 'do DNA ou RNA para evitar a auto-ligação;
3. O DNA ou RNA desfosforilado acima pode ser marcado por fosfatos radiomarcados (via polinucleotídeo quinase T4)
Estrutura química
Especificação
| Itens de teste | Especificações |
| Atividade Enzimática | 5U/μL |
| Atividade de endonuclease | Não detectado |
| Atividade de exonucleação | Não detectado |
| Atividade de roubo | Não detectado |
| Atividade RNase | Não detectado |
| ADN de E.coli | ≤1cópia/5U |
| Endotoxina | Teste LAL, ≤10EU/mg |
| Pureza | ≥95% |
Transporte e armazenamento
Transporte:Ambiente
Armazenar :Armazenar entre 2-8°C
Novo teste recomendadoVida:2 anos
