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  • Ultra Nuclease HCP1013A

Ultra Nuclease


Número do gato: HCP1013A

Pacote: 20μL/200μL/2mL/20mL

UltraNuclease é uma endonuclease geneticamente modificada derivada de Serratia marcescens.

Descrição do produto

Informações do produto

UltraNuclease é uma endonuclease geneticamente modificada derivada de Serratia marcescens, que é capaz de degradar DNA ou RNA, de cadeia dupla ou simples, linear ou circular sob uma ampla gama de condições, degradar completamente ácidos nucleicos em oligonucleotídeos 5'-monofosfato com comprimento de 3-5 bases .Após a modificação da engenharia genética, o produto foi fermentado, expresso e purificado em Escherichia coli (E. coli), o que reduz a viscosidade do sobrenadante celular e do lisado celular na pesquisa científica, mas também melhora a eficiência da purificação e a pesquisa funcional da proteína.Também pode ser usado na terapia genética, purificação de vírus, produção de vacinas, indústria farmacêutica de proteínas e polissacarídeos como reagente de remoção de ácido nucleico de resíduo hospedeiro.


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  • Características do produto

    Nº CAS

    9025-65-4

    CE Não.

    3.1.30.2

    Peso molecular

    30kDa

    Ponto de isolação eletrica

    6,85

    Pureza Proteica

    ≥99%(SDS-PAGE e SEC-HPLC)

    Atividade específica

    ≥1.1×106U/mg

    Temperatura ideal

    37ºC

    pH ideal

    8,0

    ProteaseActivity

    negativo

    Carga biológica

    <10UFC/100.000U

    Proteína residual da célula hospedeira

    ≤10 ppm

    Metal pesado

    ≤10 ppm

    Endotoxina Bacteriana

    <0,25EU/1000U

    Buffer de armazenamento

    Tris-HCl 20 mM, pH 8,0, MgCl2 2 mM, 20 mM

    NaCl, 50% Glicerol

     

    Condições de armazenamento

    Transporte ≤0 ° C ; -25 ~ -15 ° C Armazenamento, validade de 2 anos (evitar congelamento-descongelamento).

     

    Definição de Unidade

    A quantidade de enzima usada para alterar o valor de absorção de △A260 em 1,0 em 30 minutos a 37 °C, pH 8,0, equivalente a 37 μg de DNA de esperma de salmão digerido por corte em oligonucleotídeos, foi definida como uma unidade ativa (U).

     

    Controle de qualidade

    Proteína residual da célula hospedeira: kit ELISA

    Protease Resíduos: 250KU/mL UltraNuclease reagiu com substrato por 60min, nenhuma atividade foi detectada.

    Endotoxina Bacteriana: LAL-Test, Farmacopeia da República Popular da China Volume 4 (Edição 2020) método de teste de limite de gel.Regras Gerais (1143).

    Carga biológica: Farmacopeia da República Popular da China Volume 4 (Edição 2020) - Geral

    Regras para teste de esterilidade (1101), Padrão Nacional da RPC, GB 4789.2-2016.

    Metal pesado:ICP-AES, HJ776-2015.

     

    Operação

    A atividade da UltraNuclease foi significativamente inibida quando a concentração de SDS estava acima de 0,1% ou EDTA

    a concentração foi superior a 1 mM. O surfactante Triton X-100, Tween 20 e Tween 80 não teve efeito na nuclease

    propriedades quando a concentração estava abaixo de 1,5%.

    Operação

    Operação ideal

    Operação válida

    Temperatura

    37°C

    0-45℃

    pH

    8,0-9,2

    6,0-11,0

    Mg2+

    1-2mM

    1- 15mM

    TDT

    0-100mm

    >100mM

    2-Mercaptoetanol

    0-100mm

    >100mM

    Íon metálico monovalente

    (Na+, K+ etc.)

    0-20mM

    0-200mM

    PO43-

    0-10mM

    0-100mm

     

     Uso e dosagem

    • Remover o ácido nucleico exógeno dos produtos vacinais, reduzir o risco de toxicidade residual do ácido nucleico e melhorar a segurança do produto.

    • Reduza a viscosidade do líquido de alimentação causada pelo ácido nucleico, reduza o tempo de processamento e aumente o rendimento de proteína.

    • Remover o ácido nucleico que envolve a partícula (vírus, corpo de inclusão, etc.), o que é propício

    para a liberação e purificação da partícula.

     

    Tipo Experimental

    Produção de Proteína

    Vírus, Vacina

    Drogas Celulares

    Número de células

    1g de peso úmido da célula

    (ressuspenso com tampão de 10ml)

    Fermentação 1L

    sobrenadante líquido

    Cultura 1L

    Dosagem Mínima

    250U

    100U

    100U

    Dosagem recomendada

    2500U

    25000U

    5000U

     

    • O tratamento com nuclease pode melhorar a resolução e recuperação da amostra para cromatografia em coluna, eletroforese e análise de blotting.

    • Na terapia genética, o ácido nucleico é removido para obter vírus adeno-associados purificados.

     

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